Factor Assay (7) 썸네일형 리스트형 [WFH LAB MANUAL] Chromogenic FVIII:C Assay #INTRODUCTIONThe most commonly performed assay for FVIII:C worldwide for many years has been the one-stage assay, described in Section 23. There are limitations to the one-stage assay, including interference if lupus anticoagulant is present. More importantly, mild hemophilia A is not excluded by the fi nding of a normal FVIII:C level by one-stage assay. Several groups have reported that a subgr.. [혈우병 임상검사] 발색분석법(Chromogenic Assay) 원칙FVIII는 FIXa와 Ca2+가 있을때 인지질 표면에서 FX가 FXa로 변환하는 것을 가속합니다. 따라서 FIXa, FX, 인지질 및 Ca2+로 이루어진 희석된 검사 표본의 혼합물에서, FX가 표본에서 FVIII:C 수치에 의존하는 정도까지 활성화(FXa형성)됩니다. 특정 FXa(S-2756)에 대하여 합성 발색 기질을 추가하고, 비색법으로 자유롭게 된 P-NA를 측정하여 간접적으로 FVIII:C를 결정합니다. 이 방법을 위한 도구 (Test Team, Chromogenix)는 상업적으로 이용할 수 있습니다. 방법1. 표본(검사 혈장 또는 정상혈장)을 플라스틱 시험관 안에서 인지질/FXa/FX의 혼합물에 추가하고 37도에 5분 동안 가온합니다. 2. CaCl2를 추가하고 37도에서 5분을 더 가온한.. [WFH LAB Manual] Two stage clotting Assay for Factor VIII:C #PRINCIPLEThis assay was fi rst described in 1955 as a modifi cation of the thromboplastin dilution test. The two-stage FVIII:C assay is based on the principle that the amount of FVIII present in the system is rate-limiting during clotting of a test mixture containing FX, activated FIX, phospholipid, calcium, and FV in excess. Adsorption of plasma by aluminium hydroxide removes activated factors.. [KHF LAB Manual] 2단계 응고 분석법 (Two-stage clottinbg Assay) #검사원리1. FX의 존재하에 FIXa+Ca2+Phospholipid 와 환자의 FVIII이 반응(FVIIIa)하여 FXa를 만든다. 2. FXa는 다시 ca2+, FV, phospholipid 와 반응하여 Complex를 형성하고 이 Complex는 3. Prothrombin을 Thrombin으로 전환시켜 Fibrin clot formation을 형성한다. #검사장점1. One stage assay에 비해 variation이 적다.2. FVIII-Deficient Plasma를 필요로 하지 않는다. #이 실험은 Chromogenic Assay로 대체하여 시행하여, 임상에서는 주로 쓰이지 않는다. [혈우병 임상검사] FVIII:C에 대한 2단계 응고 분석법 #원칙이 방법에서는 검사 혈장(황산바륨으로 흡착), 희석된 일반 혈청 및 인지질의 혼합물을 사용한 트롬보플라스틴 생성실험을 통해 FVIII:C를 결정합니다. 흡착 처리 검사 혈장의 FV 수치는 결과에 영향을 미칩니다. 따라서 정제된 FV(FVIII이 없는)가 일정한 양이 있을때 측정을 실시합니다. 또는 종종 FV와 FVIII를 동시에 결정함으로 도출한 보정계수를 구합니다. 하지만 2단계 분석법은 현재 실무에서는 거의 사용되지 않습니다. 발색 분석법(Chromogenic Assay)를 더 자주 사용합니다. [WFH lab Manual] Factor Assay Based on APTT(One-stage Assay of FVIII:C, FIX, FXI or FXII) #PRINCIPLEThe one-stage assay for FVIII is described in this section. The assay is based on a comparison of the ability of dilutions of standard and test plasmas to correct the APTT of a plasma known to be totally defi cient in FVIII but containing all other factors required for normal clotting. For factors IX, XI, and XII, the assay is essentially the same and is performed by substituting the r.. [혈우병 임상검사] 1단계 응고 분석법 (One-stage clotting assay) #검사원리 : 검사혈장을 FVIII deficient Plasma에 추가하고, aPTT를 측정합니다. FVIII deficient Plasma의 aPTT검사결과는 검사혈장의 FVIII의 활성도에 반비례합니다. #검사방법 : 1. 검사 혈장을 veronal Buffer를 사용하여 10배로 희석하고, 0.1ml를 FVIII deficient Plasma와 aPTT 시약 0.1ml에 추가 합니다. 2. 혼합물을 37℃에서 5분동안 배양하고, 25mmol/L cacl2 0.1ml를 추가합니다. aPTT 응고시간을 측정합니다. 3. 상업적으로 구할 수 있는 대조 혈장을 검량선을 준비하기 위해 사용합니다. 순차적으로 희석한 대조 혈장 표본의 aPTT를 위해서 설명한 방법으로 측정하고, 10배 희석한 대조표본에서 F.. 이전 1 다음
