[혈우병 임상검사] 1단계 응고 분석법 (One-stage clotting assay)

#검사원리 : 검사혈장을 FVIII deficient Plasma에 추가하고, aPTT를 측정합니다. FVIII deficient Plasma의 aPTT검사결과는 검사혈장의 FVIII의 활성도에 반비례합니다.

#검사방법 :
1. 검사 혈장을 veronal Buffer를 사용하여 10배로 희석하고, 0.1ml를 FVIII deficient Plasma와 aPTT 시약 0.1ml에 추가 합니다.

2. 혼합물을 37℃에서 5분동안 배양하고, 25mmol/L cacl2 0.1ml를 추가합니다. aPTT 응고시간을 측정합니다.

3. 상업적으로 구할 수 있는 대조 혈장을 검량선을 준비하기 위해 사용합니다. 순차적으로 희석한 대조 혈장 표본의 aPTT를 위해서 설명한 방법으로 측정하고, 10배 희석한 대조표본에서 FVIII 농도를 100% 참조값으로 구합니다.

4. X좌표는 응고인자 활성도(% Factor VIII Activity)로 Y좌표는 응고시간 (Clotting Time (sec)로 지정하여 이중 대수 도표로서 검량선을 준비합니다. 응고시간에 상응하는 검사 혈장의 응고인자 농도는 검량선으로부터 추정합니다.